冰凍切片包埋劑的包埋流程你真的了解嗎？
更新時(shí)間：2021-12-15 點(diǎn)擊次數(shù)：1923次
冰凍切片包埋劑是一種聚乙二醇和聚乙烯醇的水溶性混合物，目前已廣泛用于免疫組化實(shí)驗(yàn)室中，其用途是在冰凍切片時(shí)支撐組織，以增加組織的連續(xù)性，減少皺折及碎裂。又因OCT混合物為水溶性，故在漂片時(shí)可溶于水，所以在以后的染色中不會(huì)增加背景染色。
利用OCT混合物（opti-mumcuttingtemperaturecompound）預(yù)先浸潤(rùn)組織，然后再進(jìn)行恒冷箱切片，使切片質(zhì)量得到改善。
目前實(shí)驗(yàn)室使用的冰凍切片包埋劑主流產(chǎn)品是日本櫻花公司的O.C.T.Compound，118ml/瓶，質(zhì)量穩(wěn)定，研究者比較熟習(xí)。
在使用OCT進(jìn)行包埋時(shí)，對(duì)于包埋模具而言，您可以選擇廠家已有的產(chǎn)品，也可以根據(jù)實(shí)際條件利用手邊已有的包埋管、包埋板等；也有心靈手巧的研究者自己利用銅版紙折疊出很漂亮實(shí)用的OCT包埋模具（當(dāng)然前提是您的用量要少）。
OCT包埋劑（SAKURA產(chǎn)品）包埋流程:
1.將放在蔗糖溶液中的組織塊取出，放入20gL-1蔗糖與OCT包埋劑1：1體積比例混合液中，室溫浸
泡2h
2.移入OCT包埋劑中室溫浸泡4h，更換新的OCT包埋劑，室溫浸泡6h.
3.將標(biāo)本置于托物臺(tái)，用恒冷箱切片機(jī)切片（一般-22℃），片厚10μm，貼于預(yù)處理的載玻片上，-20℃冰箱保存。
在實(shí)際工作中，有研究者發(fā)現(xiàn)當(dāng)包埋的樣本體積較大或者冰凍溫度要求更低一點(diǎn)時(shí)，使用櫻花的Oct進(jìn)行包埋往往很難取得理想的包埋結(jié)果。當(dāng)您遇到這樣的麻煩時(shí)，我們建議您采用另外一種Oct包埋劑TissueFreezingMedium，美國(guó)TBS公司生產(chǎn)。
如果該文對(duì)您的學(xué)習(xí)和研究能有絲毫幫助，我們都會(huì)備感欣慰。
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