避免冰晶與脫落!櫻花OCT包埋劑的正確使用流程與常見(jiàn)誤區(qū)
更新時(shí)間:2026-02-04 點(diǎn)擊次數(shù):10次
櫻花OCT包埋劑是病理切片制備中的核心輔助材料,主要用于冷凍切片時(shí)固定組織樣本,憑借良好的黏性、低溫穩(wěn)定性及與組織的相容性,保障切片完整、形態(tài)清晰,廣泛應(yīng)用于臨床病理診斷、科研組織學(xué)分析等場(chǎng)景。冷凍切片中,冰晶形成與切片脫落是兩大高發(fā)問(wèn)題,會(huì)嚴(yán)重影響染色效果與病理觀察,因此規(guī)范
櫻花OCT包埋劑的使用流程、規(guī)避常見(jiàn)誤區(qū),是提升冷凍切片質(zhì)量的關(guān)鍵。
櫻花OCT包埋劑的正確使用流程,需圍繞“樣本預(yù)處理-包埋操作-冷凍固化-切片銜接”四大步驟,重點(diǎn)防控冰晶與脫落隱患。第一步,樣本預(yù)處理,需先將新鮮組織修剪至合適大?。ㄒ话悴怀^(guò)5mm×5mm×3mm),快速用生理鹽水沖洗去除血液、黏液等雜質(zhì),避免殘留污染物影響包埋黏性;若組織含大量水分,需用濾紙輕輕吸干表面水分,減少冰晶形成的源頭。同時(shí),包埋劑需提前回溫至室溫,避免低溫狀態(tài)下倒入時(shí)產(chǎn)生氣泡,氣泡會(huì)導(dǎo)致組織固定不牢,增加脫落風(fēng)險(xiǎn)。
第二步,包埋操作,選用適配的包埋盒,先倒入少量OCT包埋劑鋪底,厚度約1-2mm,待底部包埋劑初步凝固后,將處理好的組織樣本平穩(wěn)放入,調(diào)整樣本姿態(tài)(確保待切片面朝下),再緩慢注入包埋劑,直至全數(shù)覆蓋樣本,避免用力傾倒產(chǎn)生氣泡,氣泡會(huì)導(dǎo)致組織與包埋劑貼合不緊密。第三步,冷凍固化,將包埋盒放入-20℃冷凍臺(tái)或液氮中,靜置15-20分鐘,確保包埋劑與樣本全數(shù)凝固,固化速度需均勻,避免快速冷凍導(dǎo)致組織內(nèi)部形成大量冰晶,也需防止固化不全導(dǎo)致切片時(shí)脫落。
第四步,切片銜接,固化完成后,將包埋塊從包埋盒中取出,固定在冷凍切片機(jī)上,調(diào)整切片厚度(常規(guī)3-5μm),切片前需用冷凍切片機(jī)低溫預(yù)冷5分鐘,確保包埋塊與切片刀溫度適配,減少切片時(shí)的應(yīng)力損傷,避免脫落。切片后及時(shí)將切片轉(zhuǎn)移至載玻片上,快速固定,完成后續(xù)染色流程。
使用過(guò)程中需重點(diǎn)規(guī)避三大常見(jiàn)誤區(qū),杜絕冰晶與脫落問(wèn)題。誤區(qū)一,直接用低溫包埋劑包埋新鮮組織,低溫包埋劑會(huì)導(dǎo)致組織水分快速凝固,形成大量冰晶,破壞組織細(xì)胞形態(tài),正確做法是將包埋劑回溫至室溫后使用。誤區(qū)二,組織未脫水或表面有水分就包埋,水分會(huì)降低包埋劑黏性,導(dǎo)致切片脫落,同時(shí)加劇冰晶形成,需吸干組織表面水分。
誤區(qū)三,冷凍固化不全或過(guò)度冷凍,固化不全會(huì)導(dǎo)致包埋塊松軟、切片脫落;過(guò)度冷凍會(huì)使包埋塊變脆,切片易碎裂,需嚴(yán)格控制冷凍溫度與時(shí)間。此外,包埋劑反復(fù)凍融易降低黏性,需密封保存,避免多次取用后反復(fù)凍融;包埋時(shí)避免包埋劑過(guò)少,需確保全數(shù)覆蓋樣本,形成穩(wěn)定的支撐結(jié)構(gòu)。
規(guī)范櫻花OCT包埋劑的使用流程,做好樣本預(yù)處理與冷凍固化管控,規(guī)避常見(jiàn)使用誤區(qū),是避免冰晶形成、防止切片脫落的核心。正確使用可較大化發(fā)揮其固定與支撐作用,保障冷凍切片質(zhì)量,為病理診斷與科研分析提供精準(zhǔn)的組織形態(tài)依據(jù)。
